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高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素 |
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摘要:高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素 |
黄曲霉毒素(AFT)是一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉(aspergillus flavus))寄生曲霉(a。parasiticus))产生的次生代谢产物,在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。
一、高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素实验材料: 1.1免疫亲和柱:博纳艾杰尔黄曲霉毒素总量免疫亲和柱订货号:HC09001 1.2色谱柱:Venusil MP C18(4.6*150mm,5μm),订货号:VA951505-0 二、高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素实验方法: 1.1混合 对照品溶液的制备精密量取黄曲霉毒素混合标准品(黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标示浓度分别为1.0µg/mL、0.3µg/mL、1.0µg/mL、0.3µg/mL)1mL,置10mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,作为储备液。精密量取储备液1mL,置50mL量瓶中,用70%甲醇溶液稀释至刻度,即得。 1.2供试品溶液的制备取供试品粉末约10g,精密称定,加入氯化钠2g,精密加入70%甲醇溶液100mL,超声处理20分钟,离心5分钟(离心速度8000转/分),精密量取上清液10mL,置50mL量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取25mL,通过免疫亲和柱,流速每分钟2-3mL,用水5mL淋洗,洗液弃去,使空气进入柱子,再用甲醇1.4mL分2次洗脱,收集洗脱液,用水定容至2mL,即得。 1.3测定法分别精密吸取上述混合对照品溶液20µl、供试品溶液20µl,注入液相色谱仪,测定峰面积,从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的量,计算,即得。 三、高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素色谱条件: 仪器:高效液相色谱仪(LC600) 荧光检测器:光化学柱后衍生装置(南京科捷) 色谱柱:Venusil MP C18(4.6*150mm),定货号:VA951505-0 进样量:20µl;柱温:40℃;流速:1.1mL/min 四、高效液相色谱仪技术参数: 高效液相色谱仪/LC—P600型高压 恒流泵 LC-P600高压恒流泵是微处理器智能控制的往复式双柱塞并联泵,具有工作压力高、脉动小、稳定可靠、操作方便等特点。其机械组件由电脑辅助设计,各主要零部件均在世界先进的数控加工中心制造,因此具有加工精确度高、泵体密封性能好、零件的互换性好等特点。 柱塞杆采用浮动导向结构,驱动凸轮由高强度合金钢制造。采用微处理器控制微步驱动电路,使得 驱动泵的步进电机运行平稳、噪声低、速度调节范围大。LC-P600高压恒流泵在压力为0~42Mpa的范围内,流量可以从0.001mL/min开始到9.999mL/min。这样满足了常规分析到微流量分析的需要。 在单泵等度分析时,可根据该仪器上全汉字显示液晶屏的提示语句,通过四个功能键就可变换各种操作模式,并且可以方便地设置流量、压力上下限、持续工作时间、压力单位等参数。 LC-P600高压恒流泵具有过程监测功能。微处理器实时控制泵的流量和检测输液压力。在压力超限的情况下,报警并自动停止泵的运行。 可采用LC-WS100工作站,通过RS232接口,控制多达四台泵的运行,建立多元梯度分析系统。 LC-P600高压恒流泵整体结构采用模块化设计,包括机械部分和电路部分都可以独立装拆,因此故障检查和调换都非常方便。 LC-P600高压恒流泵采用双柱塞并联泵结构,双泵头交替输液。在同样输液量的情况下,它的输出脉动要比串联泵低得多,而活塞杆和密封圈寿命要比常规串联泵长一倍。 高效液相色谱仪/LC—UV600型紫外检测器 LC-UV600紫外检测器采用了平行的双锥孔流通池,样品池和参照池完全处于对等的条件。锥孔设计的流通池,可以在同样的池体积情况下,提高通过池孔的光能量,明显降低了仪器的静态噪音和信号漂移。 光路系统采用了精密定位结构,所以精度高、偏移小。氘灯座和光路系统采用热隔离安装技术,降低了仪器的稳定时间,并且使氘灯的发热对光路系统的影响降到最低。 控制电路采用多微处理器结构,分别管理信号采集、数据处理、系统控制和通信。LC-UV600紫外检测器在做等度分析时,可以方便地通过全汉字的液晶屏与七个功能键,设置紫外光波长、滤波常数、输出量程、运行时间等参数。并且可以实现开关氘灯、光谱扫描、启动分析程序等功能。 该仪器的另一大特点是:LC-UV600紫外检测器独特地使用了数字信号直接输出的线路结构。相比以往的紫外检测器色谱信号大多数采用模拟信号输出或者是内部数字信号处理后,再转换成模拟信号输出到色谱数据处理装置,然后再经过模数转换。这样多重的转换势必导致信号畸变和干扰。而LC-UV600紫外检测器通过RS232接口将数字化信号毫无损失地送到LC-WS600工作站进行对数转换和积分处理。 LC-UV600紫外检测器可以通过LC-WS600工作站上的图形化界面,方便地实现控制氘灯开关、光谱扫描、继电器开关、波长扫描等功能。 |
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